CARACTERIZAÇÃO DE LEVEDURAS: ANÁLISE DO PERFIL DE ÁCIDOS GRAXOS

Algumas espécies de leveduras conseguem acumular até 70% do peso seco em lipídeos. O alto teor de lipídeos produzidos, aliado à grande produtividade em biomassa, torna as leveduras excelentes candidatas para produção de óleo microbiano para diversas finalidades. Este trabalho teve por objetivo analisar por cromatografia gasosa o perfil de lipídeos em cinco linhagens de leveduras isoladas de queijo. As leveduras, identificadas como QU31, QU33, QU38, QU46 e QU67, foram inoculadas num meio rico em fonte de carbono, com a razão C/N 10:1 por 72h, posteriormente foram centrifugadas e liofilizadas para a realização das análises. Os lipídios foram extraídos usando a metodologia de Bligh & Dyer et al. (1959) modificado, a partir de 1g de biomassa liofilizada, onde foram utilizados 4 mL de metanol e hexano, por 30min em ultrasom com 2mL água, o hexano foi retirado e foi realizada mais uma lavagem com 4mL de hexano e outra com 2mL de hexano. O óleo de levedura pré-extraído foi saponificado diretamente com KOH 0,5 M em metanol a 80 °C por uma hora para posterior esterificação com H2SO4 1,0 M em metanol sob aquecimento de 80 °C por uma hora. Logo após a formação dos ésteres, foi utilizado 2 mL de hexano para recuperar os derivados. Os ésteres foram então analisados em cromatógrafo gasoso equipado com o detector de ionização de chama (FID). Foi usada a coluna capilar Supelco SP2340 (60m x 0,25mm x 0,2µm) e as temperaturas do detector e do injetor foram 260 e 240 °C, respectivamente. A programação de aquecimento da coluna foi iniciada com 120 °C por 5 minutos e aumento gradual de 4 °C por minuto até a temperatura final de 240 °C, permanecendo assim por 5min. O fluxo de gás de arraste (H2) foi de 17mL.min-1. O volume de injeção foi de 1μL com razão de split de 1:100. A identificação dos picos, assim como a quantificação, foi feita pela comparação dos tempos de retenção e da área dos picos das amostras com as de padrões de ésteres metílicos de ácidos graxos (Supelco 37 components FAMEs Mix, ref. 47885-U). Os principais ácidos graxos encontrados foram o C16:0 (ác. palmítico), C16:1 (ác. palmitoléico), C17:1 (ác. heptadecanóico), C18:0 (ác. esteárico), C18:1 (ác. oléico), sendo o ácido oléico o principal representante, com concentrações que variaram de 50,27% (QU46) a 66,49% (QU38) entre os óleos analisados. Das cinco linhagens estudadas, a que apresentou maior biomassa seca a partir de 1.200 mL de meio de cultivo foi a QU 33 com 1,5 g, e a que apresentou maior rendimento em lipídeo foi a QU 38 com 5,31%. Posteriormente, estas linhagens serão submetidas a outras avaliações para verificar suas possíveis aplicações biotecnológicas. Os resultados obtidos demonstram que essas leveduras estudadas são potenciais produtoras de lipídeos com perfil de ácidos graxos adequados para fins alimentícios e produção de biocombustíveis, já que possuem ácidos graxos insaturados e de longas cadeias, incluindo alta percentagem de ácidos oleicos.